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加A試劑盒說明書
點擊次數:1672 更新時間:2021-03-09

                                             加A試劑盒說明書

 

A-Tailing Kit

加A試劑盒

目錄號:K0803

保存條件:-20℃保存。

 組分說明

                                  Cat. No.                       K0803

                    Size                           20次

                    A-Tailing Enzyme(5 U/μl)     25 μl

                    10×A-Tailing Buffer            120 μl

                    dATP,2 mM                      25 μl

 本產品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途

 產品簡介

 

   利用具有3’-5’外切酶活性的高保真DNA聚合酶,如Pfu等進行PCR擴增時,其PCR產物為不

帶A尾的平末端  DNA+*片段,如想將該片段克隆到T載體上,需要先利用A-Tailing  Enzyme在

平末端片段后加上A尾后才能與T載體上3’末端的T堿基互補連接。

    本產品是在平末端 DNA+*片段的3’末端添加一個A尾,使平末端的 DNA+*片段進行TA克隆

成為可能。本試劑盒提供了加A尾需要的所有成分,可以在30分鐘完成整個過程。與平末端

DNA+*片段克隆相比,TA克隆具有較高的克隆效率,可大大提高實驗成功率。

 

使用方法

 

1.將平末端PCR產物進行純化,若PCR無非特異擴增可用DNA產物回收試劑盒進行純化,

若PCR產物有非特異性擴增可用膠回收純化試劑盒進行純化。

2.將以上純化好的平末端DNA+*片段按以下反應體系加A尾:

 

                           試劑                      10 μl體系

                           平末端 DNA+*片段             X μl(<1 μg)

                           dATP                       1 μl 

                           10×A-Tailing Buffer        1 μl 

                           A-Tailing Enzyme           1 μl 

                           RNase-Free Water       補足至 10 μl 

 

3.輕輕混勻后72℃孵育30 min。

 

注意:加A尾的產物可以不需要再次純化,可直接用于連接反應。

 

實驗代做服務:

 

WB代做

HE染色

免疫熒光染色

蛋白相互作用分析

ELISA免費代檢測

免疫組化

熒光定量PCR

番紅O固綠染色

流式細胞檢測

激光共聚焦

透射電鏡服務

DNA甲基化實驗

免疫共沉淀(Co-IP

DNA甲基化

掃描電鏡實驗

microRNA 測序

半定量RT-PCR

分子克隆和質粒載體構建服務

原位雜交(FIsh

石蠟/冰凍切片

RNA結合蛋白免疫沉淀(RIP

CCK8檢測

蛋白雙向(2-D)電泳

蛋白雙向2D-WB

ATP/ADP檢測

Taqman探針

細胞劃痕

基因組DNA提取

 

 

滬公網安備 31011802001678號

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