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人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA Kit實驗原理
點擊次數(shù):1746 更新時間:2010-10-04

人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA Kit實驗原理


英文名稱:Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA 

1. 采用雙抗體夾心法測定標本中人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA Kit水平。
2. 首先用純化的人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA Kit抗體包被微孔板,制成固相抗體。
3. 然后往包被單抗的微孔中依次加入粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA Kit,再與HRP標記的粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA Kit抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成    藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。
4. 顏色的深淺和樣品中的粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA Kit呈正相關(guān)。
5.  zui后用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算出樣品中人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA Kit濃度

目的:測定人的血清,血漿及相關(guān)液體樣本中粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA Kit的含量。

6. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
7. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。仔細收集上清,如有沉淀,再次離心。
安全性:
1. 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。
4   Elisa試劑盒請遠離兒童
自備物品:
1 、 37 ℃ 恒溫箱
2 、 標準規(guī)格酶標儀
3 、 精密移液器及一次性吸頭
4 、 蒸餾水
5 、 一次性試管
6 、 吸水紙
 
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
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骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌、自身抗體科研ELISA檢測試劑盒
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