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人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA kit實驗原理
點擊次數(shù):1448 更新時間:2010-10-05

人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA kit實驗原理

英文名稱:Human E-Selectin ELISA
1. 采用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA kit水平。
2. 首先用純化的人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA kit抗體包被微孔板,制成固相抗體。
3. 然后往包被單抗的微孔中依次加入E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA kit,再與HRP標(biāo)記的E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA kit抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成    藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。
4. 顏色的深淺和樣品中的E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA kit呈正相關(guān)。
5.  zui后用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出樣品中人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA kit濃度
。
目的:測定人的血清,血漿及相關(guān)液體樣本中E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA kit的含量。

6. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。
7. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)去除顆粒。仔細(xì)收集上清,如有沉淀,再次離心。
安全性:
1. 避免直接接觸終止液和底物。如不小心接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴接觸試劑盒里的任何成份。
4   Elisa試劑盒請遠離兒童
自備物品:
1 、 37 ℃ 恒溫箱
2 、 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀
3 、 精密移液器及一次性吸頭
4 、 蒸餾水
5 、 一次性試管
6 、 吸水紙
 
保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
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