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葡聚糖凝膠(G-15) 洗脫溶劑分為兩類
更新時(shí)間:2021-11-06 點(diǎn)擊次數(shù):2025次
  葡聚糖凝膠(G-15)通過(guò)葡聚糖凝膠 G-25的羥丙基化制備,并且專門(mén)適合用于有機(jī)溶劑分離嗜脂性分子,天然產(chǎn)物在有機(jī)溶劑中的純化,例如類固醇,萜類化合物,脂質(zhì)和低分子量肽。
  葡聚糖凝膠(G-15) 的使用方法:
  將干粉浸泡于 60-70%乙醇中(充分?jǐn)嚢瑁?,洗去可能存在的殘留物,抽干然后濕態(tài)不間隙裝柱,絕對(duì)不能出現(xiàn)凝膠斷層(否則要重新裝柱),動(dòng)態(tài)用一倍柱體積的 60-70%乙醇淋洗,再用水洗凈乙醇即根據(jù)自己選用洗脫液平衡層析柱至少兩個(gè)柱體積直到基線變得平穩(wěn)為止,如改變?nèi)軇?yīng)該注意凝膠在新溶劑中的溶脹性質(zhì),并根據(jù)性質(zhì)確定柱高。如使用相同的溶劑,在以后的層析中柱平衡可以省略。
  葡聚糖凝膠(G-15) 洗脫溶劑:
  葡聚糖凝膠(G-15) 洗脫溶劑分為兩類:反相和正相兩種。用得最多的是反相溶劑洗脫,以甲醇——水系統(tǒng)最為常見(jiàn),先用水,逐漸增加甲醇比例,最后用 100%甲醇沖柱。正相系統(tǒng)以氯仿——甲醇最為常見(jiàn),先用 50%氯仿——甲醇,逐漸增加甲醇比例,最后用 100%甲醇沖柱。
  樣品的處理和洗脫溶劑的選擇:
  如果樣品極性大,選用反相溶劑洗脫(甲醇——水),樣品用最少體積的甲醇——水(盡可能甲醇少一些)溶解,過(guò)濾后,濕法上樣(必須要進(jìn)行過(guò)濾!否則把葡聚糖凝膠(G-15) 堵塞,就必須將葡聚糖凝膠(G-15) 的柱頭部分棄去, 造成不必要的浪費(fèi)) 。如果樣品極性小, 這選用正相溶劑洗脫 (氯仿——甲醇) ,樣品用最少體積的氯仿——甲醇溶解,過(guò)濾后,濕法上樣。

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