細(xì)胞分離液是一種被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室中的化學(xué)試劑,其主要作用是將混雜在樣本中的不同種類細(xì)胞進(jìn)行分離。細(xì)胞分離液通常包含離子與非離子兩種類型,離子類型根據(jù)離子的種類不同,也有多種表現(xiàn)形式。它可以通過(guò)其與目標(biāo)細(xì)胞之間的特定生物化學(xué)反應(yīng)分離出目標(biāo)細(xì)胞。對(duì)于離子型和非離子型細(xì)胞分離液,其分別利用了不同的原理來(lái)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分離。 離子型細(xì)胞分離液通常采用陽(yáng)離子或陰離子聚合物、負(fù)電荷基團(tuán)等化學(xué)物質(zhì)作為分離成分,通過(guò)與細(xì)胞膜表面的胞糖、磷脂、糖蛋白等生物大分子產(chǎn)生吸引作用,使得特定種類的細(xì)胞能夠黏附并固定在培養(yǎng)皿或者其他處理好的載體上。對(duì)于對(duì)應(yīng)細(xì)胞,還可以通過(guò)改變反離子的濃度、PH值和溫度等參數(shù),從而加速或者減弱對(duì)細(xì)胞表面物質(zhì)的吸引作用,以達(dá)到不同程度的分離效果。
非離子型細(xì)胞分離液通常采用聚合物(如PEG)作為主要分離成分,其原理是利用該聚合物與水之間的親疏性來(lái)進(jìn)行分離。具體來(lái)說(shuō),聚合物的結(jié)構(gòu)中含有兩種相對(duì)較強(qiáng)的化學(xué)成分:親水基團(tuán)和疏水基團(tuán)。當(dāng)聚合物被溶于水中時(shí),親水基團(tuán)會(huì)盡量與周圍的水分子結(jié)合形成氫鍵。而其中的疏水基團(tuán)則會(huì)盡可能的脫水,使得聚合物在水中形成大塊狀物,在此過(guò)程中會(huì)包裹住懸浮在水中的細(xì)胞。由于不同種類的細(xì)胞表面性質(zhì)不同,所以與聚合物的親疏性也不同,因此可以通過(guò)調(diào)整聚合物濃度和處理時(shí)間等條件以實(shí)現(xiàn)不同細(xì)胞類型的分離。
細(xì)胞分離液的分類:
密度梯度離心分離法:該種方法使用高濃度的硅膠或者聚乙二醇等物質(zhì)在離心過(guò)程中形成密度梯度,在不同密度區(qū)域中有效地分離出不同類型細(xì)胞。
磁性免疫分離:通過(guò)將靶向抗體與磁珠等物質(zhì)結(jié)合,利用磁性力將目標(biāo)細(xì)胞從混合物中捕獲,主要應(yīng)用于CD4+、CD8+T細(xì)胞、B細(xì)胞等樣本的純化。
接觸親和分離:同時(shí)含有陽(yáng)離子和陰離子的“接觸光固化”保護(hù)膜與目標(biāo)細(xì)胞表面存在相互吸引作用,以實(shí)現(xiàn)動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)和細(xì)胞的分離純化。